1目的建立潔凈度（沉降菌）的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,為沉降菌檢查人員提供正確的標(biāo)準(zhǔn)操作方法。

2范圍適用于本公司潔凈度（沉降菌）檢查的全過程。

3責(zé)任QA對(duì)本規(guī)程的有效執(zhí)行承擔(dān)監(jiān)督檢查責(zé)任，QC對(duì)本規(guī)程的實(shí)施負(fù)責(zé)。

4程序

4。1概述:本標(biāo)準(zhǔn)對(duì)塵粒及微生物污染規(guī)定需進(jìn)行環(huán)境控制的房間或區(qū)域,其建筑結(jié)構(gòu)、裝備及其使用均具有減少對(duì)該區(qū)域內(nèi)污染源的介入、產(chǎn)生和滯留的功能

4。2測(cè)試方法

4.2。1方法提要:

本標(biāo)準(zhǔn)按國家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布的《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法》,采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù),并以此來評(píng)定潔凈室(區(qū))的潔凈度。

4.2。2儀器儀器包括:培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器、那艾沉降菌檢測(cè)支架

4.2。2。1培養(yǎng)皿一般采用690mm× 15mm規(guī)格的培養(yǎng)皿。

4.2。2。2培養(yǎng)基大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏培養(yǎng)基(SDA）或用戶認(rèn)可并經(jīng)驗(yàn)證了的培養(yǎng)基.

4.3測(cè)試前的規(guī)則:4。3。1 測(cè)試狀態(tài);

4。3.1。1沉降菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室(區(qū)）的溫濕度須達(dá)到規(guī)定的要求,靜壓差、

換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。潔凈室(區(qū)）的溫度和相對(duì)濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工藝要求相適應(yīng)（無特殊要求時(shí),溫度在18℃~26℃，相對(duì)濕度在45%～65%之間為宜),同時(shí)應(yīng)滿足測(cè)試儀器的使用范圍。

4.3。1.2沉降菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室(區(qū)）已經(jīng)過消毒。

4。3。1.3測(cè)試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種，測(cè)試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報(bào)告中注明測(cè)試狀態(tài)。

4。3。1。4靜態(tài)測(cè)試時(shí),培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為30min 以上;動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間

為不大于4h。

4。3.2測(cè)試人員:

4.3。2.1測(cè)試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級(jí)別的工作服.

4。3。2.2靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于2人.

4。3.3 測(cè)試時(shí)間:

4。3。3。1對(duì)單向流，如100級(jí)凈化房間及層流工作臺(tái)，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10min后開始。

4。3.3.2對(duì)非單向流,如B級(jí)、B級(jí)以上的凈化房間，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30min后開始。

4。3.4 注意事項(xiàng):

4。3.4。1 測(cè)試用具要作滅菌處理，以確保測(cè)試的可靠性、正確性。4.3。4.2采取一切措施防止人為對(duì)樣本的污染。

4.3.4。3對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。

4。3.4。4 由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大,計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯徼鏡鑒別。

4。3.4。5采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。4.3.4。6對(duì)于單向流潔凈室（區(qū)）或送風(fēng)口，采樣器采樣口朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向;對(duì)于非單向流潔凈室(區(qū))，采樣口向上.

4.3。4。7布置采樣點(diǎn)時(shí),至少應(yīng)盡量避開塵粒較集中的回風(fēng)口;采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)，并盡量少走動(dòng).

4。3.4。8培養(yǎng)皿在用于檢測(cè)時(shí)，為避免培養(yǎng)皿運(yùn)輸或搬動(dòng)過程造成的影響,宜同時(shí)進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn),每次或每個(gè)區(qū)域取1個(gè)對(duì)照皿，與采樣皿同法操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養(yǎng)ⅢL(TSA或SDA）一起放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，結(jié)果應(yīng)無菌落生長。

4.4 測(cè)試步驟:

人人文庫

卡雷P3美/0S

4.4。1 采樣方法:

4。4.1.1儀器和用具:培養(yǎng)皿.4.4。1。2方法:

a采樣點(diǎn)一般在離地面0。8m高度的水平面上均勻布置。

b采樣點(diǎn)多于5點(diǎn)時(shí),也可以在離地面0.8m~1.5m高度的區(qū)域內(nèi)分層布置,但每層不少于5點(diǎn)。

c打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0。5h，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置.